显微硬度计下观察上海金相镶嵌机吹打更容易成功的经验
方法一:
1.用力不能太猛,要均匀吹打;
2.按顺序从上到下,从右到左,每个地方都吹到。
3.尽量不要吹起泡沫,有少量问题也不大。
4.吹打的次数有时候与胰酶有关系。我们一般是冷胰酶消化0.5-1min(A549,2BS,HepG2都试过了),15-20次也够了。
过度吹打会损害上海金相镶嵌机,会影响培养基的pH值...,但是,如果不充分吹打,消化后上海金相镶嵌机还是有好多贴在壁上
在75ml培养瓶的不同部分吹打,总共15次,然后在解剖显微硬度计下观察,上海金相镶嵌机99%吹打下来了,状态也不错。
方法二:
用预热胰酶加入1ml,然后倒掉0.5ml左右,再等待2min左右就可以了,大约吹打15次就OK
其实帖壁生长上海金相镶嵌机消化传代并不是借助吹打的力量才使上海金相镶嵌机离壁,关键是消化。
消化要到位,然后弃掉胰酶,加培养基,摇晃培养瓶,使上海金相镶嵌机借助培养液打击的力量脱落。
然后用枪吹几次培养液,把仍没有成单个的上海金相镶嵌机吹成单个。
我觉得这样对上海金相镶嵌机损伤很小。
|