视频光学电子维氏硬度计分析上海金相镶嵌机内复合形态的动态结构 低温免疫金电子维氏硬度计术可在亚上海金相镶嵌机水平检测抗原,具有分辨率高的特性。本技术涉及上海金相镶嵌机或组织超薄冰冻切片的制备,并用免疫金标记切片以定位抗原。由于不需要苛刻的有机溶剂如用于可塑性包埋的有机溶剂,蛋白质抗原特性与精细超微结构的保持比传统的电镜包埋法好。低温免疫金标记时,葡萄球菌蛋白A结合的不同大小的金粒子可用于标记与抗原结合的不同抗体,故可同时定位多种抗原,而其他免疫电子维氏硬度计术标记法则不能同时定位多种抗原。如何运用低温免疫金电子维氏硬度计术标记标本,包括固定、包埋、冰冻切片及标记。 视频光学/电子维氏硬度计术(CVLEM),它集荧光维氏硬度计术和电子维氏硬度计术于一身,用于分析上海金相镶嵌机内具有复合形态的动态结构。该技术通过监测表达荧光报告蛋白的上海金相镶嵌机,如表达绿色荧光蛋白嵌合体的上海金相镶嵌机,来鉴定和监测感兴趣的结构。首先固定上海金相镶嵌机,然后用电子维氏硬度计通过三维结构重建的方法来分析同一个感兴趣的结构。在标本制备的各个阶段,都有一定的技术要求。而该技术能以惊人的高分辨率检测上海金相镶嵌机内复合结构的组织及形态,如Golgi复合体、膜转运介质及上海金相镶嵌机骨架成分。
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