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酶这样的大分子常会有好几个溶解度***小点 酶的x射线结晶分析学 x—射线结晶分析学是用x射线衍射手段研究分子在晶体中的三维结构。一个酶结晶的晶体格子中，各个原子排列非常规则，原子周围的电子云经x射线照射后会发生散射，其散射强度将随电子云的密度增加而增加，亦即随原子序数的不同而有变化。这些散射的结果如果收集在底片或磁带上，经过测量和电子计算机的运算，即可算出整个酶分子的三维结构。 结晶的培养 x射线衍射分析需要先培养出体积肥大、形状适当的单晶。以现有的x射线衍射技术，晶体每个方向的厚度不得少于0．2mm。晶形良好但过于细长或扁平的晶体并不适用。 像酶这样的大分子在溶剂中相互间的作用非常复杂，有时甚至难以理解，无法描述。但是结晶的基本原则是怎样能使纯酶的溶液慢慢地达到溶解度***小的状态，从而诱导酶分子在稍过饱和的溶液中，进入晶体格子的适当位置，使分子相互间发生***有利的作用，遂从溶液中结晶出来。 像酶这样的大分子常会有好几个溶解度***小点，随大分子本身的浓度，缓冲液的性质及浓度、pH、温度等因素而定。这可由某些蛋白质会有多晶形同时存在的事实得到证明。而每当我们找到了这样的条件，就可以在酶溶液中加入适量的沉淀剂，使酶结晶出来。为了确保能得到晶形完好的单晶，必须配合各种蛋白质的浓 度，缓冲液的性质，沉淀剂的种类及用量、pH、温度等，以达到***适当的沉淀点。因为涉及的条件太多，譬如pH，有时能不能够得到好的单晶，相差只在0．1上下，所以***初尚有一些原则可循，到了后来，简直是在黑暗里摸索了。有时常要作过几千个试验，才能找到培养酶单晶的***好条件。 又酶分子是柔性的，在溶液中其构象会随环境的变迁而改变，呈不断的运动状态。如何能够使这样的酶分子变得比较稳定，不那么柔软好动，亦即使全体分子更为均质化，以利于晶体的生长，非常难以解决。通常都是加入适当的小分子配体，如经过修饰的底物、辅酶及竞争性抑制剂等。也可以试将酶分子本身加以修饰，以达到目的。 一般都先用悬滴蒸汽扩散法(Hangingdropvapordiffusion)宋搜寻这个能进行结晶的试点。
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