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植物细胞样品-观察的多种方法的光学硬度计 |
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植物细胞样品-观察的多种方法的光学硬度计 早期使用硬度计观察的样品通常是活的,或者说至少短时间是活的。固定和染色技术随着硬度计的进步而发展。 由于硬度计光学的改进,光学系统的局限性确定了样品制备的必要性。硬度计研究者根据光学的局限性作出了适当的让步。放大、数值孔径值、分变率限度、工作距离和色彩偏差纠正被认作为相关因素。 另外,各种照明方法包括亮视野、暗视野、相差和荧光相继被引人主流硬度计。随着这些类型硬度计的利用,人们接受了这样一个事实:即样品需要制备成能满足硬度计光学局限的要求。通常大多数这些的制备需要固定样品。 现在已经能通过各种分子的、生化的、免疫学和显像技术直接观察活体的已知类型分子的动力学特性。例如,广泛使用的绿色荧光蛋白(green fluorescent protein , GFP)标记方法就能直接观察活体细胞的特殊结构成分。不过,为了在硬度计视野下观察活的和健康的哺乳动物细胞,还存在一些与培养基的温度和pH等相关的技术问题。当观察非哺乳动物细胞或植物细胞时,这不是一个重要问题。 按经典分类,活细胞实验能分成两类:确定自然行为的发育学研究和研究调控因子效应的诱导性改变。体内体外现象之间的关系对于哺乳动物活细胞研究极为重要。在活细胞硬度计观察期间精确地模拟分离样品的宿主条件十分重要。活细胞硬度计观察的多种方法。
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