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| 相差以及荧光集一体的光学硬度计的应用特点 |
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相差以及荧光集一体的光学硬度计的应用特点 荧光硬度计荧光硬度计检术中另一种类型的可见光硬度计检术，其应用率正在迅速增长。荧光硬度计检术中，用于照射标本的光线，为某一种波长的光线。所见到的影像，是一种分子发射的结果，这种分子可吸收初级激发光线，然后再以射出波长较长、能量较低的光线。在聚光器下面和物镜上面各放置适当的滤片，以保证好象是处于“自身发光的”状态。次级发射可来自标本中天然存在的“荧光物”，或来自引入、与标本的某些特殊成分相结合的荧光染料，或者来自与特异抗体相连结的荧光染料，由于荧光影像所固有的高度反差和特异性，因此，荧光硬度计技术是将来大有前途和十分重要的一种显微技术。 相差硬度计相差硬度计是一种很重要的光学设计，它可把肉眼不能观察的折射率的微小差异，转换成可以看到的强度差异。 因此相差硬度计可观察活细胞的某些成分，而在通常情况下，这些成分只有在已死的染色标本上才能看到（图1-7 ），光学硬度计的影像平面内，来自相当于带有志其四周不同折射指数的标本透明区域的光线，是处于周围介质光线的相位之外，但是，通常的光学硬度计对这些相位差异并不敏感，所以，在这些各部结构之间不显示强度差异，因而没有反差。相差硬度计配备有特殊光栏、吸收板和相位转换板，这些装置可用来：（1 ）部分地区分背景照明光线和来自小的透明标本微细结构的、在宽角上分散绕射的光线；以及 （2 ）通过在影像平面上光线的相互作用这种方式，转换这两种光线成分的相位和强度，从而在原先只存在相位差异的部位，产生强度差异和反差。 相差硬度计的几个主要缺点为：（1 ）由于不能完全区分背景光线和绕射光线，其影像周围可出现晕；（2 ）吸是来自小的物体或来自边缘部分的、快速变换的延迟的相位差异。
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