使用紫外激光束来激发荧光染料分子发光的硬度计

共聚焦硬度计(Confocal microscopy)使用紫外激光束来激发
荧光染料分子发光。激发光束通过细光纤，或针孔状、狭缝状的光
圈聚焦到标本(通常是死标本)上。样品发出的荧光被聚焦在检测器
上，探测器的前方也有一个相应的小光圈或狭缝。两边使用的光圈
越小，挡在检测器外的未聚焦光线就越多。电脑根据所收集的荧光
重新成像，其分辨率比其他类型的光学硬度计高40％。由于共聚焦
硬度计可以对标本精确对焦，所以成像如同一把很薄的刀片切开标
本。对于较厚的标本，则可以记录下一系列连续的对焦成像切面，
并将这些平面还原为三维模型。这种硬度计有利于在不干扰生物活
动的前提下研究菌群，如研究活的生物膜。同时它也可以定时拍照

尽管硬度计和染色技术提供了十分有价值的微生物信息，但是
，这些方法还不足以鉴别大多数微生物。硬度计的历史·在硬度计
发明之前，微生物不为人所知。列文·虎克可能
是个看到微生物的人，他开创了硬度计技术，这种技
术使极其微小的物体也能被肉眼观察到。·列文·虎克的单式显
微镜不能看到标本的细节。如今的复
式硬度计可以提供几乎无失真的图像，使我们能够更仔细
地研究微生物。