硬度计观测的革兰氏染色为什么不能用老龄菌？
1、一般以大肠杆菌为例，选用培养16-24小时为宜，因为若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏染色阳性菌转为阴性反应硬度计下出理假阴性现像。
2、根据不同的细菌，生长特性不同，培养多长时间进行革兰氏染色的佳时间不能一概而论。
3、另外，在革兰氏染色的过程中还应注意乙醇的脱色时间以及涂菌时涂片的厚度，否则易出现假阳或假阴性现象。一般做革兰氏染色时都要同时做一张已知革兰氏阴性 和革兰氏阳氏性菌的混合涂片，以便做为染色的对照。