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| 土壤样品悬浮液的直接硬度计检-生物技术研究 |
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土壤样品悬浮液的直接硬度计检-生物技术研究 微生物种群的垢硬度计计数法土壤悬浮液的直接硬度计检是计数土壤微生物的通用方法，土壤样品放在搅拌器中用如焦磷钠等试剂或洗涤剂分散以破坏土壤团聚体，一定体积的悬浮液或放在1 厘米面积的硬度计载玻片上或在已知尺寸大小的微生物计数室内用琼脂混合，琼脂硬固后从计数室内取出放在硬度计载玻片上固定和染色，这个技术称作载玻片技术，它提供了土壤颗粒释烯度和已知体积内的微生物数，此方法对真菌计数特别有用，而对细菌计数则很困难，因为此法不易把细菌和土壤颗粒区别开来，在水研究中使用很长时间的一种技术是用一种无色的或黑色的聚多糖滤纸过滤土壤悬浮，然后将带有微生物的滤纸固定在载玻片上并染色同，很强地吸附在固体基质上或包陷在团聚体中的生物是不能进入土壤悬浮液的。 染色技术的许多种，传统的孟加拉红和酚苯胺蓝染色已在很大程度上为荧乐染色所取代，是古老和广泛地使用于细胞内DNA 的染色，活细胞吸收少量的染料出现绿色；死细胞缺乏有功能的细胞质膜来吸收大量的染料而显红色，然而，细胞的颜色也取决于染料的浓度、细胞壁的性质，以及细胞中RNA 与DNA 的比值，明显区别活细胞与死细胞是困难的，啶橙易吸附于土壤颗粒，对粘土染色不好，而对砂土染色则很有用。 荧光异硫氰酸盐吸附于蛋白质的基团，对细菌染色是极好的，但不吸附所有的真菌，对于真菌来说，荧光染料——聚糖键，使用具荧光素的二乙酸盐染色剂在理论上能区分活性与非活性菌丝，开始是不发荧光染色剂的，吸附后被酯酸分裂成荧光素和己酸盐，游离的荧光菌丝是可以发荧光的，当用于土壤制备物时，2%-10%的真菌菌丝能显示出荧光，对幼嫩菌丝和菌丝末稍是很好的指示物。
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