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| 硬度计通常配备有3—4个物镜-生物暗视野观察 |
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硬度计通常配备有3—4个物镜-生物暗视野观察 硬度计通常都配备有3—4个物镜，其放大倍数分别在4×到100×之间。物镜的工作距离指的是在准确的焦点状态下透镜的外表面与盖玻片(如果使用的话)表面或与被观察样品之间的距离。数值孔径值越大、分辨率越高，物镜的工作距离就越短。 在有效放大范围内，放大倍数越大，能看清的被观察对象越小。人眼的分辨能力在0．2 mm，因此物镜的有效放大倍数的极限是其数值孔径值的l 000倍。大多数标准硬度计使用10×目镜，在使用油镜时达到其高放大倍数，即1 000×。在使用高质量的物镜时，也可以配备15×目镜，从而获得l 500×的有效放大倍数，但在此基础上进一步提高放大倍数将并不能使我们看到更多的细节。使光学硬度计的总放大倍数达到10 000×是完全做得到的，但这种放大将仅仅是将一个模糊的斑点进一步扩大而已。而电子硬度计具有足够高的分辨率，可以保证更高的有效放大倍数。 恰当的样品照明对硬度计的分辨率也非常重要。在光源和样品之间安装凹面镜的硬度计所形成的锥形照明光束很窄，数值孔径值也低。而在载物台下方安装镜台聚光器可以改善硬度计的分辨率。作为一个大的集光透镜，聚光器可以形成宽的锥形光束投射到载片并进入物镜，从而增加数值孔径值。 暗视野硬度计 通过对照明方式进行简单的改变，可以对活的细胞及生物进行观察。将一个中空的光束在样品上聚焦，只有被样品反射或折射的光线才能进入物镜形成物像，其他未经反射或折射的光线不能进入物镜，使得在明亮物像周围形成黑的背景。正由于这种显微术视野的背景是黑色的，因此被称为暗视野显微术。暗视野硬度计可被用于对一些细菌进行鉴定，例如体形很薄并具有特定外形的梅毒病原体梅毒螺旋体。很多细胞较大的真核微生物的内部结构也能用暗视野硬度计进行观察。
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