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测压技术可测定细胞匀浆摄取的氧产生的二氧化碳 |
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测压技术可测定细胞匀浆摄取的氧产生的二氧化碳 测压法:这种技术常用来研究呼吸作用,即由细胞匀浆所摄取的氧并同时产生的二氧化碳。可以测定一定容量下反应系统压力的变化,而且经过适宜的装置也能计算氧吸收和放出的二氧化碳。这种直接的测定方法只限于用来研究个别一些酶,因为只有极少数情形才有气体的摄取或放出。这种技术可以扩大到用来研究因反应系统中含有碳酸氢盐而产生酸的反应,也可测量由于酸的作用而放出的二氧化碳。 近来,这一技术已部分被氧电极的发展所取代,氧电极是测量一个溶液的氧张力,其方式与用氢电极来测量pH相似。 一般化学方法:在有些情况下,上述这些专门的酶测定法一个都不能用。这时就必须利用一些普通的化学方法来追踪底物的消失或产物的出现。例如,测定催化磷酸酯类水解的一些酶,可采用在反应进行一段时间后,剧烈改变pH或加热使酶失活来停止催化作用,然后用标准磷酸盐分析法测定释放出来的磷酸盐,例如形成磷钼酸盐复合体并还原之。同样,催化蛋白质水解的一些酶,可以用估计自由基团的增加来测定。在这些情况中通常是利用化学分析的比色法,因为这些方法快速、方便、灵敏。事实上,分光光度计已经成为酶学家的有价值的工具。
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