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| 色谱的基本原理-树脂(固定相)材料研究实验硬度计 |
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色谱的基本原理-树脂(固定相)材料研究实验硬度计 色谱法 色谱法是许多纯化方案的核心并拥有一些共同的特征。首先，目的蛋白溶解在流动相里，通常是缓冲水溶液中。溶液通常来源于细胞提取物并且可以直接用于色谱分离。当流动相通过树脂(固定相)时，根据蛋白质功能基团及物理性质的不同，固定相可以选择性的吸附分子。物理性质包括电荷、分子质量、疏水性和配体亲和力。固定相的选择与纯化的蛋白质性质密切相关。 色谱的基本原理是一根柱子，柱子中填充树脂，上样之前用缓冲液来平衡树脂。样品进入柱子，依赖蛋白质和树脂上的功能基团之间的相互作用的不同来分离。这些相互作用会降低一种或几种蛋白质通过柱子的时间，而其他蛋白质不受阻碍。这样速度较快的通过柱子的蛋白质就和其他剩余的蛋白质分离开来。有些时候蛋白质混合物与功能基团的相互作用不同，强的相互作用使其流过柱子的速度变慢，弱的相互作用使其稍微快一些，而没有相互作用使其流过树脂毫无阻力。 蛋白质溶液在流动相和固定相之间平衡伴随着溶液以阶梯式从塔板到塔板在柱子中流过。柱子的分辨率会随着理论塔板数的增加而增加，实际上，有很多增加理论塔板数的方法，如增加柱子的长度，减小填料颗粒的尺寸。增加分辨率的值是为了使两种相似的流动的溶质以合理的效率分开。
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