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破碎细胞膜制作匀浆-生物细胞研究硬度计
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破碎细胞膜制作匀浆-生物细胞研究硬度计  在破碎细胞膜的方法中,以同轴匀浆器法为常用。此匀浆器由一个具有精密口径的  磨砂玻璃管,以及一个与之紧密配合的杵子所组成杵子与管壁之间有O.05~0.5mm的间隙。当杵子借机械力高速转动时,组织细胞便在杵子与管壁之间挤磨而破碎。匀浆管要浸人冰浴中借以散热,避免因高速转动产生之热使酶变性失活。此法比较温和,但仍有10%的线粒体、15%的溶酶体及过氧体受到损伤。若用高速转动的刀片来破碎细胞,则对细胞器的损伤更大。超声波虽可因震动而使细胞破碎,但亦能使细胞器受到破坏。另有一种高压匀浆法对单细胞的破碎很有效,是将细胞悬液置于惰性气体(如氮)中,经一定时间平衡后,又使之骤然降至常压,这时细胞内压大于外界,易使细胞破碎。    为了减少细胞器的破坏,制作匀浆时还必须选用适当的介质,以尽量保持细胞器的形态、结构与功能。由于蔗糖的溶解度大,性质又不活泼,既能保持细胞器的结构与功能,又可防止各细胞器的彼此聚集。常用的浓度为0.25 mol,可维持衡定的渗透压,介质的密度和粘度也不太大,分离所需的(离心)转速也不必太高。

 


 
 
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