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微生物学技术检测相差硬度计观察试验仪器 |
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微生物学技术检测相差硬度计观察试验仪器细胞生长曲线 当细胞接种于培养瓶后,它们便进入2~24小时的迟缓期,随 后进入对数生长期(称之对数期)后细胞汇合成单层细胞,细 胞生长减少或不生长即为平衡期。这些时期对于每个细 胞系都有其特性,而且可以得到重复性好的测量数据——迟缓期 时间长短,对数期二倍增长时间以及平衡期饱和密度,决定于环 境条件是否能保持稳定。 生长周期的测定对于设计常规传代以及实验方案都是重要 的。每个时期中的细胞行为以及生物化学特性都发生有意义的变 化。因此,当在细胞中加入药物或试剂以及收获细胞时,控制细胞 生长周期是十分重要的。从细胞生长曲线的形状,也可获得培养物繁殖潜力的信息,但通常认为分析克隆生长是比较容易 而且较少含混不清或误解。对于污染经常性的检查是观察培养液pH的改变(一般pH下降,但有些霉菌污染时则pH值升高),培养液有无云雾状物,在硬度计下有无细胞外颗粒状物质或在培养液中有没有来路不明的漂浮物。如果已经查明发生污染,丢弃的瓶子不能打开,应立即高压灭菌。 如果怀疑污染,要移出样品,用相差硬度计观察,革兰氏染色或用标准微生物学技术检查。 支原体的污染:培养物可由培养液中血清、胰蛋白酶或操作本身感染支原体。支原体感染肉眼观察不到,但影响细胞的生长。它们存在细胞通常是不明显的,故应间隔一定的时间(每隔1~3月)检查培养物中的支原体是很重要的,因为他们能严重地影响细胞的生物化学、抗元性以及生长特性。曾经推荐过多种检查实验,但广泛使用的是Chen的DNA荧光染色技术。
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