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微生物相衬硬度计优点增加对比度是相差技术 |
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微生物相衬硬度计增加对比度是相差技术对比度 如果不能将微生物从悬浮的基质中分离出来,会降低硬度计的放大率和分辨率。利用染料或调节光学系统,可增强对比度,便于显微观察。 微生物被染料染色后,光线经过时被吸收的程度高于背景,从而产生色差,加深了对比度。观察细胞内部结构或者细胞壁时,染色是一个非常有用的手段,如革兰染色。然而,染色经常使细胞结构发生变化,这个问题值得注意。虽然亚甲基蓝类染色剂不改变细胞形态,但化学药品对微生物终究是有毒性的。还有一个选择就是负染色法,利用苯胺黑使背景颜色加深,突出微生物的浅色而增加对比度,而且不影响细胞活性。通过染色法,能够得到微生物的相关信息,如细胞的形状和荚膜的位置等。相差硬度计不能观察颜色,所以可以用明视野硬度计来观察染色后的样品。 另一个增加对比度的方法是利用相差技术,它把透过标本的可见光的光程差变成振幅差,从而提高了各种结构间的对比度,使各种结构变得清晰可见。光线衍射的程度是由介质的折射率决定的。相差硬度计就是来增强微生物和周围环境之间的折射率而提高它们的对比度,使微生物形态更易于观察。与明视野硬度计相比,相差硬度计的优势在于可不用染色而清楚地观察活细胞。因为相差硬度计观察的样品不用染色,所以不适用于染色的样品。
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