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生物荧光-荧光素酶分析经常用于检测ATP量
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生物荧光-荧光素酶分析经常用于检测ATP量生物荧光 生物荧光是激发态时生物分子发出可被测定荧光的过程,这个过程可被用来测定微生物代谢产物中ATP的量。理论上,测定ATP的量可以反映活细胞数量,因为活细胞数越多,产生的ATP量越多。单个酵母细胞产生的ATP量要多于单个细菌细胞产生的量,因此对酵母的检出限可以低至10个细胞。 荧光素一荧光素酶分析经常用于检测ATP的量,因此荧光素一荧光素酶生物荧光技术已越来越多地替代传统消毒和平板计数法来检测无菌程度。现在,又有一些生物荧光检测试剂盒投放市场。只要购买检测器后,每次测试只需包括样品收集容器、消毒和其他试剂的费用,价格便宜。虽然该方法已被应用于酒精类和非酒精类饮料的生产中,但是通过检测ATP的量来推算活细胞的量存在一个很大的弊端。微生物种类不同以及同种微生物所处的生理状态不同(如受伤状态、饥饿状态等),ATP的产生量相差很大。而且,该方法不能分辨由酵母或是别的微生物产生的ATP,使实验结果难以诠释。比浊法和光密度 一直以来,分光光度计与浊度测定仪被微生物学家用来快速检测细胞密度和特定化合物浓度(如颜色、苹果酸等)。分光光度计是检测光通过某种样品溶液后被吸收或是通过的光强度,浊度测定仪测定的是光的散射程度。 分光光度计接收通过的光(420nm或者650nm)与光源处在同一条直线上,而浊度测定时需与光源垂直。要事先绘制好吸光值和细胞密度或其他一些参数的标准曲线,才可以通过测定吸光值推算出未知样品的细胞密度等。因此一个成功的应用就是需要用其他计数方法来校正吸光度,常用的就是直接平板计数法。

 


 
 
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