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显微分光光度计在硬度计上附加光度测量系统 |
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显微分光光度计在硬度计上附加光度测量系统 显微分光光度计则采用了双波长细胞光度测量法,可在硬度计下对单个细胞微细结构中的核酸、蛋白质、酶、糖原等化学物质进行形态学定性定位观察,又可进行定量测定。该仪器具有作透射光照明的吸收光测量、落射光照明的荧光和反射光测量及荧光光谱分析等多种定性定量测定功能。一般采用二波长一测量场法,也可采用一波长二测量场法或单束光扫描测量法测定细胞化学反应后被测物质的相对含量,由计算机程控,对各测量点的透光强度值进行处理,并进行消光值计算和分析,打印出细胞化学反应产物的光密度值(O.D)、光密度分布直方图、样品的数字图形及各种信息的分析结果。但显微分光光度计价格昂贵,功能较少,目前应用不多。 用于吸收细胞光度测量的商品仪器,用于扫描和集成显微密度测量。有的通常在硬度计上附加一个光度测量系统作为测量仪器。有一种显微测密度计(microdensitometer)也可测量细胞化学反应(如DNA的Feulgen反应)的密度,以确定DNA等物质的含量。 又如扫描硬度计光度计系统是由一架标准硬度计和两台光度计组成。这些仪器由于价格及用于细胞化学反应的定量测定有一定的局限性,尚未得到广泛的推广应用。 微荧光测量(microfluorimetry) 荧光测量法,只能用于细胞化学中的荧光反应终产物。该法灵敏度较高,特异性可通过选择适当的激发波长和发射测定波长而获得。 硬度计不可分辨的小颗粒,用荧光可以测定,且无分布性误差,因此可以用单个测量点代替大面积测量,从而节省许多时间。用落射光可测量不透明的或厚的标本。但荧光测量的实际应用还是有限,能进行荧光反应的物质及建立恰当的标准物尚
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