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光学显微技术包括光学硬度计技术和光学显微制片技术 |
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光学显微技术包括光学硬度计技术和光学显微制片技术光学显微技术 显微技术 人体的细胞一般小于20脚,是肉眼无法分辨的,因此需借助硬度计进行观察分析。目前普遍使用的是复式光学硬度计,它是根据光学原理,使用一组玻璃透镜再加上精密的机械工艺制成的仪器。光学显微技术是指通过光学硬度计观察物体的技术。由于细胞一般无色透明,直接用硬度计观察不易分辨其结构,而往往需要经过制片处理。因此,光学显微技术包括光学硬度计技术和光学显微制片技术两部分。 光学硬度计技术 光学硬度计是利用可见光作光源,通过一组玻璃透镜包括目镜、物镜、聚光镜放大被观察物体,提高分辨力的仪器。所谓分辨力,指人眼在25cm的明视距离处分辨物体结构小间距的能力。一般光镜的分辨力为0.39μm,放大倍数可达1600倍。根据不同的用途,光学硬度计可分为以下几种类型:①普通光学硬度计,用于细胞一般形态结构的观察,可看到细胞核、核仁、细胞膜、线粒体、中心体、高尔基体、染色体等。是应用为广泛的硬度计。②相差硬度计,在普通光镜的聚光器上加一个环形光阑,在物镜的后焦面加一个相板制成。其原理是通过改变光线的振幅差,提高细胞结构的对比度而提高分辨力。主要用于活体细胞的观察。③暗视野硬度计,可在普通光镜的聚光器中央加一块遮光板,使照明光线不直接进入物镜,只有经过标本的散射光进入,这样视野的背景是黑暗的,而被检物体为亮点,暗视野硬度计也适于观察活细胞,但不能用于细胞内部结构的观察。④荧光硬度计,以非可见光紫外光和蓝紫外光作光源,激发标本中的荧光物质使其发射荧光,可用于细胞特殊结构的观察。紫外光或蓝紫外光由特制的滤光器或滤光系统产生。细胞中的某些物质如叶绿体能自发产生红色荧光,而有些结构如男性人体细胞的Y染色体等则需经过荧光染料如口丫啶橙等染色才能产生荧光。
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