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| 细胞悬液培养可分两类:单层细胞培养和悬浮培养 |
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细胞悬液培养可分为两类：单层细胞培养和悬浮培养 细胞计数的方法：首先用0．1克分子量的枸橼酸溶液，使细胞核与细胞质分离，然后再用O．1％结晶紫溶液，使细胞核染色，将已染色的细胞用生理盐水作定量稀释，并注入细胞计数器进行计数。也可采用不染色直接注入细胞计数器中计数。为了增加计数的准确性，计数前必须搅动悬液菠细胞分布均匀；在悬液注入计数器时，不要用力太大，只须从吸管中轻轻地挤出一滴悬液，依靠毛潮管的吸力，使悬液流入计数器。计数时，在低倍硬度计下数出四焦姻天诲中的细胞数，仅计算有胞浆和胞核的完整细胞数，根据以下方程式，算出每毫升悬液中的细胞数 如果稀释细胞的悬液并非l毫升，只须将细胞数／毫升再乘以悬液毫升数，即得悬液中的细胞总数。 由于染色的细胞核看起来比较清楚，而且可以区别出正常健康的细胞核和早期坏死阶段的细胞核，为了计数的准确性，还是采用染色计数的方法为好。(近代电子细胞计数器已逐步代替了细胞计数器的计数方法)。 悬液培养法 细胞悬液培养法可分为两类：一类是单层细胞培养，或称定量培养。细胞在这种培养里虽然是用悬液状态接种于培养瓶内，但接种后细胞立即沉入瓶底，固着干玻璃底面进行增殖。因此，这种培养实际上还是一种静止状态的培养。另一类是悬浮培养，它是一种活动状态的培养，即通过一种特殊的装置，使悬液不停地滚动，细胞在培养液中始终保持悬浮的状态。这种培养法可使细胞大量的繁殖，获得大量的细胞。今仅介绍单层细胞培养法。 单层细胞培养：单层细胞培养，多用于不同实验条件下细胞的定量测定和病毒的研究上。 单层细胞培养，其细胞的来源有两种，一种可先通过母培养，即先经过组织块的培养而获得细胞悬液，再进行单层细胞培养。另一种来源是利用胰蛋白酶或其他酶的消化作用，直接把新鲜组织的细胞间质破坏，使细胞分散成游离细胞，再制成细胞悬液进行单层细胞培养。一般经过母培养的方法比较容易成功，而用组织直接消化的方法是比较难以成功的。今以免肾为侧，说明单层细施培养的过程。
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