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| 相衬硬度计用特殊聚光器和物镜来强化生物不同结构 |
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相衬硬度计用特殊聚光器和物镜来强化生物不同结构 相差硬度计 许多染料都会杀死微生物，因而多数微生物活体无法进行染色观察。不经染色就观察活菌体则需要采用相差硬度计(Phase-contrast microscopy)技术。相差硬度计用特殊的聚光器和物镜来强化生物不同结构的折射率差异。光通过具有不同折射率的物体时会减速并发生衍射。不同介质中光速的差异就会导致亮度的不同。诺尔马斯基(微分干涉差)硬度计 和相差硬度计一样，诺尔马斯基硬度计(Nomarskimicroscopy)也是利用折射率的差异来观察未染色细胞及其结构。但微分干涉差硬度计的分辨率比标准相差硬度计更高。由于景深(始终处于焦距的标本厚度)很小，它能产生近乎三维的图像。 荧光硬度计 荧光硬度计(Fluorescence microscopy)利用紫外线照射激发分子，使其释放出波长比入射光更长的光。不同波长的光呈现出不同亮度的橙色，黄色或黄绿色。有些微生物，如假单胞菌(Pseudo一17zonas)，受紫外线照射时会自然发出荧光。而另外一些微生物，如结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)和苍白密螺旋体(Treponema pallidum，梅毒病原菌)，必须经发荧光的染料即荧光染料(fluorochrome)处理后，它们才能在黑色背景下突现出来。吖啶橙是一种能结合核酸的荧光染料，根据荧光硬度计滤光系统不同，它呈现出明亮的绿色、橙绿色或黄色。有时，它被用来监测样品中的微生物生长，它与活细胞结合会发出明亮的橙光或绿光。
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