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菌种斜面培养和平板培养技术-菌种鉴别技术 |
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菌种斜面培养和平板培养技术-菌种鉴别技术 1.斜面培养 将培养基注入试管中,灭菌后摆成斜面,可较长期贮存备用。在出外采集虫尸样本时,可用小试管携带一些选择性培养基,随时进行分离。接种时斜面试管上贴上标签,注明接种菌名称、日期、接种人姓名等。斜面培养还是菌种保藏及运输邮寄的方便方法,它封闭严密,易避免杂菌污染。 2.平板培养 平板培养是将溶化冷却到45—50℃的琼脂培养基注入灭菌的培养皿中,直径9—1cm的培养皿注入12—15mL。轻轻转动培养皿,使之均匀分布,凝固后即成平板。接种好的平板,为防止水分蒸发,要翻转倒置于恒温箱中培养,多数虫生真菌不要求高温,一般在25=C左右为宜,培养5天以后再行观察。 根据培养目的不同,接种方法也不同,为观察菌落形态或测定菌落直径生长量应采取点植培养,通常自斜面上蘸取极少量孢子,点植于皿的中心或成三角形的3点。为分离菌种则采用划线分离培养和稀释分离培养。为计数活孢子数量,则采用稀释接种培养。 稀释接种培养方法有两种,即基内接种和表面接种,基内接种是将相应稀释倍数的菌液1mI,用灭菌吸管先置于灭菌皿中,再把溶化冷却到50℃的琼脂培养基注入,迅速摇动混合均匀(顺时、逆时方向各10次),凝固后培养。表面接种是把0.1ml或0.2ml的相应菌悬液接种于平板表面,再用玻璃刮铲涂布均匀,培养后计数。
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