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| 冷冻干燥原理是使微生物快速冷冻微生物原结构不受损 |
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冷冻干燥原理是使微生物快速冷冻微生物原结构不受损 冷冻干燥保藏法用这种方法能在稳定的状态下保藏很长时间，就保藏方法来说是极优越的。冷冻干燥的原理是使微生物快速冷冻，然后通过蒸发作用，使水分直接从冰转化为蒸汽而将水分除去。因此，在处理过程中，微生物不是在液体中，因而能够保持原来结构不受损害。此法用于保藏大部分产生孢子的真菌(尤其是半知菌)效果很好，但是对虫霉目以及主要形成菌丝体类型的真菌则不适用，保藏期可达数年至数十年。 冷冻干燥有专门的设备，一般是将保存的孢子悬浮在保护剂中(血清是很好的保护剂，但是一般可用脱脂牛乳)，再把少量的悬液在无菌条件下分装在灭菌的安瓿中，然后接在抽气系统上，安瓿与抽气系统之间，一般加一干燥器，以五氧化二磷或硅胶等作干燥剂。安瓿沉放在干冰和乙酸乙酯的混合冷冻液中，抽气使悬浮液完全干燥(约5—6小时)，安瓿封口后在室温下或冰箱中保存。冷冻的方法很多，有在一40℃低温冰箱中冷冻1小时，也可使用冰块加食盐的办法得到低温。 菌种的恢复，是将安瓿用酒精消毒后打开，加入与冷冻前悬浮液等量的灭菌水，静置20一30分钟，然后用划线或其他方法培养。 液氮保藏法 将真菌放入一196℃的液氮中，保藏期可达很多年。其做法是把琼脂菌种块投入盛有10％甘油或10％二甲亚砜保护剂的安瓿或特制的有盖塑料管中以每分钟降低l℃的速度缓慢冷却到一2 5--一40℃后浸入液氮中快速冷却。取出使用时应置于37℃左右的温水中轻轻振荡直到冰晶完全融化(快速融化)。
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