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| DNA聚合酶PCR原理-生物科研实验级硬度计 |
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DNA聚合酶PCR原理-生物科研实验级硬度计 早在1958年，科学家分离出DNA聚合酶(polyHlerase)后，就曾设想利用DNA聚合酶扩增大量DNA片段，但当时受DNA测序较难、没有核苷酸合成技术及没有分离得到耐热性的DNA聚合酶等原因限制而没有发展起来。直到1985年，美国Cetus人类遗传实验室的年轻科学家Mullis在偶然灵感的启迪下发明了有划时代意义的聚合酶链反应(polynlerase dlain reaction)，简称PCR技术——一种与体内功妊复制过程类似的体外扩增特异DNA片段的技术，它是耐热性砀qE在模板、4种dⅣrP及两种特异性引物存在的条件下的酶促聚合反应，数小时后，能将极微量的目的DNA片段扩增数十万倍，乃至千百万倍，无需经过繁琐费时的基因克隆过程，便可获得足够数量的目的DNA片段，所以有人称之为无细胞分子克隆法。在PCR反应中，由双链DNA高温变性、低温退火与适温延长三个步骤构成一个循环。理论上，经咒次PCR循环后，目的研qA片段的分子数可以达到2”，而每一次循环则仅需要几分钟。 自其产生起就以简单和快速的特点而成为科研人员在分子生物学研究中常用且必备的一种手段。在短短的十几年中，依据P(、R扩增技术的原理进一步发展了包括反转录P(、R、反向PCR、锚定P(、R和嵌套PCR等在内的多种P(’R扩增技术，有力地推动了分子生物学的发展，加速了科研成果的产生。可以预计，在今后生物学的深入研究中，P(’R技术必将凭借其简洁、快速、灵活多样的优势，更加广泛地应用于分子生物学、If缶床诊断、法医学和考古学等领域，并成为人们向未知生物科学领域进军的一把利剑! 如下所示，一个完整的PCR过程由预变性、主体循环、补平和低温保存4个部分组成。预变性的目的是使模板充分变性，露出引物的互补序列。补平的目的是使末端不齐的产物补平或进一步加A的尾巴。循环结束后来不及取出PCR产物时，在低温条件下保存以防止产物降解，但长时间低温对PCR仪有害。
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