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荧光硬度计下观察细胞伤损实验-硬度计测定技术 |
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荧光硬度计下观察细胞伤损实验-硬度计测定技术细胞损伤实验荧光滤片,在荧光硬度计下观察。 无论从生物学或实用目的的角度出发,研究细胞损伤需要一些方法,来鉴别在细胞培养或组织内常少数存在的受伤细胞。策略设计 根据用正常不能渗透的大分子示踪剂标记细胞质的原理鉴别受伤细胞。细胞膜破裂,示踪剂进入细胞质,然后破裂处封闭,示踪剂位于细胞内。死细胞的细胞膜破裂后不能封闭,只要洗去全部外源性示踪剂则不被标记。有几种细胞损伤示踪剂供选择。荧光素标记的右旋糖酐比较便宜,不同分子质量(5000~2 000 000)的右旋糖酐均可使用。如果使用醛固定的标本,须用结合有赖氨酸的右旋糖酐。 如果在硬度计测定或荧光测定方面可观察到损伤示踪剂,能够鉴定受伤细胞示踪剂的优点是已知加入和除去示踪剂的时间,如荧光素标记的右旋糖酐。因此,可用于脉冲追踪(pulse-chase)标记方案,以便确定细胞损伤时间的选择。白蛋白是一种很好的细胞损伤示踪剂。在动物整体研究中,白蛋白的突出优点是高浓度时许多组织的细胞外环境保持正常。
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