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生物实验-高分子化合物的混合物电泳的应用 |
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生物实验-高分子化合物的混合物电泳的应用电泳的应用 电泳技术可以用于带净电荷分子的分离。低压纸电泳已广泛地用于氨基酸、多肤、蛋白质、核普酸、核酸以及带电碳水化合物衍生物的分离。但是,小分子在纸上进行低压电泳时会发生明显的扩散。对小分子要得到更好的分离,一般使用高压电泳,因为分离所需要的时间短,因此分子扩散较小。醋酸纤维素在某种程度上已取代了纸作为支持介质。高纯度的醋酸纤维素对样品的吸附作用要比纸小,因此对样品成分能得到较好的分辨率。醋酸纤维素还有一个优点,即由于支持介质染色的本底较浅,而能更好的显示各种成分。酷酸纤维素电泳在临床上已广泛地用于分离血清蛋白(包括塘蛋白和脂蛋白)和血红蛋白,并且也用于免疫电泳。纸层和薄层高压电泳都能用于分离由于各种代谢紊乱而有可能以高浓度存在于血浆和尿中的氨基酸。薄层电泳对于分离氨基酸和核昔酸一类较小的分子特别有用,因为它分离迅速,具有好的分辨率,并且由于它可用于双向分离,所以可以进行蛋白质和核酸水解物的“指纹图谱”分析。薄层电泳也可用于胺类、茶酚类、酚类和无机离子的分离。 凝胶作为电泳分离的支持介质,大大地扩大了这种技术的使用范围。聚丙烯酞胺一类凝胶的孔径可以选择,以促使带有相同电荷,但具有不同大小和形状的分子的分离,这是一个很大的优点。因此,凝胶电泳非常适合于核酸(特别是RNA分子)和蛋白质(包括酶、同功酶和结构蛋白)混合物的分离。淀粉和琼脂凝胶的孔径不像聚丙烯酚胺那样熊被控制,但是,这些凝胶已发现在分离高分子化合物的混合物中是有用的。 等电聚焦和等速电泳在分析水平上具有很好的分辨率,但是,与幕式电泳一样更适用于制备工作。这些技术能用于分离较大量的物质,并且在分离结束后能回收这些物质。多肚、蛋白质、核普酸等已用这些技术进行了成功的分离。
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